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酶聯講解:制備培育基的基礎方法
發布時間:2019-12-20   點擊次數:74次

1、培育基pH的初步調正
 因培育基在加熱消du過程中、pH會有所改變,培育基各成分徹底溶解后,應進行PH的初步調正。例如,牛肉浸液約可降低pH0.2,而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因而,對這個過程,操作者應隨時留意探究經驗、以期能掌握培育基的終PH,確保培育基的質量。PH調整后,還應將培育基煮沸數分鐘,以利培育基沉淀物的析出。

2、培育基的過濾弄清
液體培育基必須弄清,瓊脂培育基也應通明無明顯沉淀,因而,需要采用過濾或其它弄清方法以到達此項要求。一般液體培育基可用濾紙過濾法,濾紙應折疊成折扇或漏斗形,以防止因液壓不均勻而引起濾紙破裂。

3、可用清潔的白色薄絨布過濾:
亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙重復過濾。如過濾法不能到達弄清要求、則須用蛋清弄清法。即將冷卻至55~60°C的培育基放入大的三角燒瓶內,裝入量不得超越燒瓶容量的1/2,每1000ml培育基參加1~2個雞蛋的蛋白,強力振搖3~5分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121°C加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。

4、培育基的分裝
培育基的分裝,應按運用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等恰當容器內。分裝量不得超越容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時hao能運用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培育基時,分裝量應以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當。分裝容器應預先清洗潔凈并經干烤消du,以利于培育基的徹底滅菌。每批培育基應別的分裝20ml培育根據一小玻璃瓶中,隨該批培育基同時滅菌,以為測定該批培育基終pH之用。

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